AB SCIEX: TrippleTOF™ & Biopharmaceutical Analysis
Yongming Xie
Monday, December 3, 2012
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Chapters
TripleTOF™质谱技术在生物制药研究领域应用
主要内容>主要内容
生物制药研究概况'
什么是生物药 'Biologic'
质谱在生物制药领域的作用: 基础篇
质谱在生物制药领域的作用: 高级篇
AB SCIEX TripleTOF™质谱技术简介
TripleTOF™ 5600质谱系统
AB SCIEX TripleTOF™ 5600+系统
AB SCIEX中端TripleTOF™: TripleTOF™ 4600系统
AB SCIEX TripleTOF™ 4600 System
AB SCIEX TripleTOF™ 系统典型工作模式
TripleTOF质谱系统定性模式
TripleTOF质谱系统定性模式: 快速、高效、准确的蛋白鉴定
TripleTOF质谱系统定量模式
高分辨一级质谱MS定量
高分辨一级质谱MS定量
高分辨率MRM定量 – MRM
HR
MRM
HR
: Alpha casein S2
新的全扫描高分辨定量工作流程
小结
AB SCIEX公司液相系统简介
为生物药分析提供更高的灵敏度
Eksigent ekspert™ ultraLC 100: 常规流速超高效液相色谱系统
Eksigent ekspert™ microLC 200: 微升流速超高效液相色谱系统
Eksigent ekspert™ nanoLC 400: 纳升至微升流速超高效液相色谱系统
TripleTOF™ 质谱系统在生物制药领域中的应用实例
TripleTOF® 系统对药用单克隆抗体的表征
IgG1结构及四个层次的分析
层次 1 完整抗体蛋白分子量测定
层次 1 完整抗体蛋白分子量测定: 实验条件
LC-MS 测定抗体完整分子量
抗体分析极佳的灵敏度
单抗精确分子量测定
纳升级超高效液相带来更高的灵敏度
层次 2 单克隆抗体还原后分子量的测定
完整蛋白精确分子量的测定
完整蛋白精确分子量测定
精确分子量测定
层次 3. 肽图分析
Level 3. Peptide Mapping(肽图测定)
层次 3. 肽图分析
肽图分析– TripleTOF® System
Level 3. Peptide Mapping
层次 3. 肽图分析: 序列覆盖示例
层次 3. 肽图分析: 翻译后修饰自动检索示例: N端环化
单个肽段的相对定量
单个肽段的相对定量
ProteinPilot™ 搜索结果
修饰肽段 – 去酰胺化相对含量比较
二硫键分析
二硫键分析: 还原 (+/-) 烷基化, 胰酶酶解
N-linked 糖肽分析
重建质谱图(糖肽完整分子量状态)
重建质谱图(糖肽完整分子量状态): 糖肽分析
糖肽的相对定量
层次 4: PNGase F糖苷酶酶解产生糖链的糖型分析
层次 4: PNGase F糖苷酶酶解产生糖链的糖型分析: 液相-荧光检测器检测
TripleTOF 系统上采用LCMS方法进行糖型分析
荧光标记后糖链的分析
荧光标记后糖链的鉴定及定量
荧光标记后糖链的MS 及 MS/MS质谱图
用MS/MS图谱对荧光标记糖链进行解析
荧光标记后糖链的鉴定及相对定量
TripleTOF®系统对于单克隆样品分析具有极佳的灵敏度, 分辨率和质量准确度
谢谢
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